生物技術(shù)中細(xì)胞培養(yǎng)是核心工藝，高水平的細(xì)胞培養(yǎng)依賴(lài)于高質(zhì)量的培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基的主要成份中，動(dòng)物血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖發(fā)揮著重要作用。血清不僅富含多種蛋白、生長(zhǎng)因子等細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成分，同時(shí)可提供貼壁因子、蛋白酶抑制劑等保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
在動(dòng)物血清中牛血清的應(yīng)用最為廣泛，所以保證牛血清的質(zhì)量也是促進(jìn)生物制品質(zhì)量提高的重要環(huán)節(jié)。一般體外細(xì)胞培養(yǎng)的牛血清多采用胎牛血清、新生牛血清、小牛血清。
不同牛血清的來(lái)源：胎牛血清源自健康母牛體內(nèi)的胎牛，是通過(guò)胎牛心臟穿刺采血獲取的血清；新生牛血清從出生2周內(nèi)的新生牛靜脈取血獲取。小牛血清采自出生2周到1年內(nèi)的小牛靜脈取血；
牛血清成品的獲取
• 胎牛、新生牛、小牛的血液采集及儲(chǔ)存
• 原血全程冷鏈運(yùn)輸
• 原血冷凍離心，收集血清、凍存
• 血清使用前解凍、過(guò)濾
• 成品質(zhì)量檢測(cè)
血清使用前解凍
① 將血清從冷凍室移至2~8℃冰箱解凍，再放置室溫進(jìn)行徹底解凍，這樣可以避免溫度變化太大，造成蛋白析出；
② 解凍時(shí)需不斷均勻搖晃，這樣操作可以使血清的溫度和成分均一，以減少絮狀沉淀物的生成；
③ 嚴(yán)禁將血清在37℃長(zhǎng)時(shí)間孵育解凍，否則血清可能會(huì)產(chǎn)生沉淀&許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)受到破壞而影響血清品質(zhì)。
血清使用前過(guò)濾工藝
步驟1：粗血清大多數(shù)前處理會(huì)使用線繞濾芯或膜堆過(guò)濾去除粘性物質(zhì)；根據(jù)客戶(hù)工藝的不同，也會(huì)使用到濾袋、玻纖進(jìn)行過(guò)濾。
PP折疊濾芯
PES/PVDF膜濾芯
步驟2：一步0.45-1μm或2-3μm+0.45-1μm兩步預(yù)過(guò)濾，其作用是去除雜質(zhì)的同時(shí)保護(hù)后端膜過(guò)濾，比較常用的膜材質(zhì)是親水性PES或PVDF；
步驟3：0.22μm和0.1μm的除菌、除支原體過(guò)濾，確保成品無(wú)細(xì)菌、無(wú)支原體。
過(guò)濾工藝其他注意點(diǎn)有哪些？
1. 血清過(guò)濾開(kāi)始時(shí)，濾速可以控制相對(duì)小一些，后逐步升至正常濾速，這樣可以延長(zhǎng)濾芯的使用壽命；
2. 一般血清過(guò)濾前和過(guò)濾完成后，需對(duì)0.22μm/0.1μm過(guò)濾產(chǎn)品進(jìn)行完整性檢測(cè)。
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